




Investigadores

Alfredo Ulloa
Investigador Titular Caulloaa@unam.mx
Técnicos académicos

Rubén Gutiérrez
Técnico Académico Titular Crgutierrezsagal@cic.unam.mx

Teresa Zariñán
Técnico Académico Titular Azarinan@cic.unam.mx
Laboratorio de Biología Molecular
Contacto
Para cualquier información relacionado con el servicio
Enviar correo a:
Teléfonos:
- +01 (55) 5487 0900
- Ext. 6335 ó 6336 (lab)
Servicios:
- - Secuenciación de ADN en electroforesis capilar
- - Análisis de fragmentos
- - Determinación de contaminación por Micoplasma
- - Banco de líneas celulares
- - Uso del laboratorio de cultivo celular para la preparación de muestras que se procesarán en la RAI
La secuenciación Sanger de ADN se ofrece en dos modalidades:
- Electroforesis capilar de las reacciones de secuencia realizadas por el usuario.
- Reacción de secuencia, purificación y electroforesis capilar.
- ADN de aproximadamente 1 kb (amplicones): 100 ng/reacción
- ADN de aproximadamente 5 kb (plásmidos): 500 ng/reacción
- ADN de aproximadamente 20 kb (Cósmidos): 5000 ng/reacción
En esta modalidad, las muestras por analizar deben estar en tubo eppendorf de 1.5 ml completamente deshidratadas, etiquetadas con las iniciales del usuario seguido de numeración consecutiva.
En esta modalidad el usuario debe proveernos el ADN que desea secuenciar y el oligonucleótido que se utilizará como primer o cebador.
El ADN debe tener una relación (Densidad Óptica a 260/280 nm) mayor o igual a 1.8 y menor o igual a 2.
La integridad del ADN debe haber sido comprobada en electroforesis en gel de agarosa.
El ADN debe haber sido resuspendido preferiblemente en H2O mQ estéril libre de endonucleasas.
La cantidad de ADN que el usuario debe de proveernos está en función de su tamaño:
Preparación de la muestra
En un tubo eppendorf de 0.2 ml agregar el ADN, 4 µl de primer (0.8 pmol/µl) y H2O suficiente para un volumen final de 15 µl.
La calidad del proceso de secuenciación depende principalmente de la calidad y cantidad de ADN entregado.
Antes de enviar las muestras, se recomienda analizarlas por gel y cuantificarlas por espectrofotometría. La cuantificación por gel es subjetiva y NO debe usarse para estimar la concentración de ADN.
La RAI puede adicionar los oligonucleótidos:
82- pUC/M13- FORWARD | 5> CGC CAG GGT TTT CCC AGT CAC GAC >3 |
113- pSG5-SV40PA | 5> GTC TAG AGT CGA CCA GAC ATG >3 |
130- pSG5 – β- globin | 5> CCT CTG CTA ACC ATG TTC ATG >3 |
170- pcDNA3.1-T7 PRIMER | 5> TAA TAC GAC TCA CTA TAG GG >3 |
203- pcDNA3.1-CMV PRIMER | 5> AGT TTG TTT TGG CAC CAA AAT CAA >3 |
289- pcDNA3.1-BGH | 5> CCT ACT CAG ACA ATG CGA TGC >3 |
La mecánica de trabajo será la siguiente:
- Las muestras a secuenciar junto con su respectiva solicitud serán recibidas en el área de recepción en el horario y fecha acordado previamente con el técnico encargado. El usuario debe anotarse en la bitacóra de recepción de muestras y entregar la imagen del gel.
- Los resultados se enviarán vía correo electrónico.
Cualquier duda, aclaración o sugerencia debe ser dirigida a la M. en C. Teresa de Jesús Zariñán García o al Dr. Rubén Gutiérrez Sagal.
Cultivo celular:
El Laboratorio de Cultivo Celular de la RAI es utilizado principalmente por investigadores/docentes de la Red de Apoyo a la Investigación, así como por investigadores de otros departamentos que no cuenten con un Cuarto de Cultivo en su Departamento.
En el Laboratorio de Cultivo Celular se pueden realizar, cumpliendo las normas establecidas en el Reglamento del Laboratorio de Cultivo Celular, procedimientos experimentales de cultivo de líneas celulares, así como la preparación de medios de cultivo y/o otras soluciones que requieran esterilidad.
Las líneas celulares que se deseen trabajar en la RAI, deben de estar libre de contaminación, para ello es necesario determinar que no existe contaminación de micoplasma, está prueba es realizada por los técnicos de la RAI y el costo corre por cuenta del usuario. Una vez confirmado que la línea celular se encuentra libre de micoplasma se permite el uso del Laboratorio de Cultivo Celular.
Requisitos de las muestras
- El usuario debe de llevar una botella de cultivo de 25cm 2 con células cultivadas por lo menos 3 días con el mismo medio de cultivo. Para citas contactar a la M. en C. Teresa Zariñán vía correo electrónico.
Criopreservación de Líneas Celulares.
- La conservación de líneas celulares se realiza a través de su almacenamiento en nitrógeno líquido para lo cual se utiliza un criopreservador que contiene nitrógeno líquido. Las Líneas Celulares almacenadas en el criopreservador son analizadas previamente de contaminación por microplasma.
Horarios de atención y servicio: lunes a viernes de 8 am a 4 pm.
Tarifas 2025
SERVICIO | CONSORCIO1 | INSTITUTOS NACIONALES DE SALUD2 | OTRAS DEPENDENCIAS PÚBLICAS | INSTITUCIONES PRIVADAS |
---|---|---|---|---|
Secuenciación de ADN. Completa | $240.00 | $264.00 | $276.00 | $312.00 |
Secuenciación de ADN. Sólo electroforesis | $96.00 | $108.00 | $120.00 | $144.00 |
Análisis de fragmentos | $120.00 | $144.00 | $180.00 | $300.00 |
PCR en tiempo real StepOne (corrida) | $240.00 | $276.00 | $312.00 | $360.00 |
PCR en tiempo real Quant Studio 12K Flex (hora) | $360.00 | $396.00 | $456.00 | $540.00 |
Detección de micoplasma | $1,440.00 | $1,680.00 | $2,040.00 | $2,400.00 |
1. Usuarios Consorcio RAI (INCMNSZ, INCAN, INCICH, INMEGEN, UNAM).
2. Usuarios afiliados a los Institutos Nacionales de Salud y Hospitales de Alta Especialidad de la CCINSHAE.